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Nalgene程序降温盒使用方法与经验分享
发布时间:2018-03-05   点击次数:1298次
   Nalgene程序降温盒使用方法与经验分享

  Nalgene程序降温盒经验1:冻存盒外表面有刻度的吧,异丙醇液面要高于zui底线。

  Nalgene程序降温盒肯定是先放在室温,然后放进去细胞,置于-80,利用异丙醇实现梯度降温啊。

  Nalgene程序降温盒经验2:实验室冻存盒平时放4度,需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮,贵重的细胞尽快转移,不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的,很方便,效果也不错的。

  Nalgene程序降温盒经验3:异丙醇的量是要保证的,不能低于表明的线,否则不能起到很好的程序性降温作用,我们是在4度放置,放了细胞后立马放到-80度冰箱,第二天再转移到液氮,效果很不错。

  异丙醇熔点:-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性有毒液体。注意了有可燃性!急性毒性:口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激数据:眼睛- 兔子100 毫克/ !请注意清理!

  Nalgene程序降温盒经验4:应该不可以把冻存盒放4°的,因为梯度降温的起始点是室温20°左右,所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次,而且保证液体量达到刻度线,否则降温效果会受到影响。

  Nalgene程序降温盒经验5:冻存盒里的异丙醇一般是250ml,低于刻度了要加上,理论上是5次以后更换异丙醇,但是异丙醇对环境有害,我们可以多用几次,只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO对细胞有毒性,尤其是室温的时候,所以冻存盒和冻存液先放4°,等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里,还放回4°,等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。

  Nalgene程序降温盒盒这个梯度降温可大大提高细胞冻存的存活率,由于Nalgene程序降温盒存在100%浓度的异丙醇和泡沫内衬,因此Nalgene程序降温盒也可以用于细胞复苏。

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